Bio-Gene Technology Ltd.

News / Activities应用新闻

2024-10-15

Myra 迷你自动化工作站助力激酶检测

对激酶活性进行准确的检测依赖于精准地加入特定浓度、体积和次数的试剂、底物和抑制剂。Myra迷你自动化工作站能够提供无可比拟的分液精度，减少人工干预，实现人为误差最小化，从而彻底变革激酶分析的操作。

Myra的主要特点

Myra可通过编程来处理复杂的常规分液操作，包括通过倍比稀释制备底物或抑制剂的浓度梯度，这对于动力学分析和抑制剂表征分析至关重要。高精度地对低至2ul体积的液体快速执行这些常规操作的能力直接影响采集获得的数据的质量和可靠性。

Myra可运行的激酶检测类型

• ADP-Glo 激酶检测（ADP-Glo Kinase Assay），测量由激酶反应随时间而产生的腺苷二磷酸（adenosine diphosphate，ADP）的化学发光检测方法

• 时间分辨荧光共振能量转移（Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET），是灵敏可靠的荧光检测技术，结合了时间分辨荧光和荧光共振能量转移的原理，能使背景信号最小化，同时最大化信噪比。

Myra用于激酶检测的优势

Myra 可确保反应条件被高度一致地复制，从而促进生成米氏分析（Michaelis-Menten analysis）所必须的数据。这种一致性可以在不同的底物浓度条件下精准确定反应速度，这对于绘制Michaelis-Menten 曲线及计算动力学参数至关重要。

Myra可以快速稳定地检测一系列浓度范围的大量化合物，从而高通量筛选激酶抑制剂。这一能力在药物发现的早期非常宝贵，因为筛选的效率能够显著影响潜在的候选药物确认的速度。

小结

Myra的先进性和高性能使其成为激酶检测方案和动力学分析必不可少的仪器。通过Myra能够对激酶抑制剂进行更准确、更高效和更高通量的筛选，在促进药物开发中的作用怎么强调都不为过。对于这一领域的研究者来说，采用Myra代表着对实验工作流程的质量和效率的战略性投资。

应用示例：Promega ADP-Glo Kinase.

ADP-Glo Kinase 时间进程实验用来确定以多肽作底物的激酶的动力学

Myra激酶检测方案

典型的 ADP-Glo™ 激酶检测流程始于激酶反应，在ATP存在的条件下，激酶使底物磷酸化。随后加入 ADP Glo™ 试剂终止激酶反应并消耗剩余的ATP，准备用于ADP检测的体系。最后，激酶检测试剂将ADP转化回ATP，后者通过化学发光信号进行定量。采用Myra实现流程自动化，能够保证每一个步骤都精确地计时并执行，从而确保多个板和孔之间的分析完整性和一致性。

实验方案

ADP-Glo 激酶分析：多肽按1:2 稀释，总体积2 uL。将多肽在384孔板上稀释，随后加入2 uL 激酶。5分钟后加入4ul终止液。系统性加入反应组分需要考虑特定的所需时间，以保证精确地加入终止液。标准品为三个重复。绘制ADP标准曲线以计算ATP至ADP的转化。