药物筛选/分子生物学qEV尺寸排阻外泌体分离柱
qEV尺寸排阻分离柱是由新西兰IZON公司研发和生产的一种基于尺寸排阻色谱法（Size Exclusion Chromatography, SEC）原理的外泌体分离-纯化技术。该技术具有简便、快速、容易标准化操作的特点，只需要15min就可以从多种类型样本中提取到完整的高纯度外泌体。相较于其他方法，qEV所提取的外泌体纯度更高、浓度更高、活性也更高，还可以重复使用。qEV分离的外泌体尤其适用于外泌体蛋白组和外泌体功能实验。
IZON公司qEV尺寸排阻外泌体分离柱提供两种分离范围。常用的 70 nm qEV 色谱柱对 70 nm 至 1000 nm 的颗粒具有最佳回收率，而 35 nm 色谱柱的最佳回收率范围为 35 nm 至 350 nm。
qEV尺寸排阻外泌体分离柱工作原理
qEV分离柱基于尺寸排阻色谱原理工作，即溶液中的分子和颗粒在通过由多孔树脂颗粒组成的色谱柱时按其尺寸进行分离。在qEV分离中，较大的颗粒无法进入树脂中的孔隙，而是相对较快地流过树脂。相反，小于分离范围下限（35 nm 或 70 nm）的颗粒则会进入树脂中的孔隙，这会减慢它们的流动速度。通过这种基于尺寸大小的分离，EVs 和可溶性蛋白质以高分离度分离，由此可以获得纯化体积。
qEV 分离柱广泛用于细胞外囊泡 (EV) 领域，其原因不仅仅在于其易用性和温和、高效。更重要的是qEV 分离柱使用尺寸排阻色谱 (SEC) 原理将污染的可溶性蛋白与外泌体和其他 EV 分离。IZON公司的 Gen 2 qEV 分离柱柱可去除大约 99% 的可溶性蛋白质——提供比现有系列（传统 qEV 色谱柱）更高纯度的样品。由于非 EV 组件的共同分离会影响下游应用和分析，因此 EV 分离中的纯度问题是一个重要问题。使用 IZON公司的qEV 分离柱分离得到的EV，可以直接进行下游分析，包括可调电阻脉冲传感、电子显微镜、蛋白质组学和 RNA 分析。
qEV尺寸排阻外泌体分离柱操作流程
1. 用洗脱缓冲液冲洗柱子。
2. 装入500μL样品。
3. 最开始的3ml是空隙体积，继续向分离柱中添加PBS以洗脱囊泡（外泌体）。
4. 收集空隙体积后的1.5mL液体为高纯度外泌体。
qEV尺寸排阻外泌体分离柱优势
高纯度：去除99%以上的可溶性蛋白质，去除95%以上高密度脂蛋白
无损伤：保持细胞外囊泡的完整性和生物功能
标准化：每根分离柱均经过标准化、质量保证，并通过ISO13485标准认证
可靠性：只要15min就可以得到完整外泌体样本，已经在大规模的实验室试验得到证实
适用性：适用于多种类型样品的外泌体提取，包括：血清、血浆、尿液、细胞上清、脑脊液、唾液等；尤其适用于外泌体功能研究中，用于细胞培养或动物注射的高纯度外泌体的获得