Meta-Ready TM 细胞能量代谢检测分析系统
让细胞代谢研究更简单
多指标细胞能量代谢检测方案
(ATP/OCR/ECAR/胞内氧/ROS)
于微孔板检测细胞代谢的解决方案
检测细胞代谢
Meta-ReadyTM检测系统配合安捷伦的MitoXpresssXtra秏氧检测试剂盒和pHhXtra糖酵解检测试剂盒可帮助您检测以下细胞代谢指标:
>检测活细胞线粒体活性和糖酵解活性
>将间接终点法细胞检测转化为简单直接的"mix-and-measure"方式去检测线粒体功能和糖酵解活性,并实时监测代谢变化信息
>从单层贴壁细胞检测扩展到悬浮细胞和特定3D培养细胞检测
>通过标准96孔和384孔板"mix-and-measure"方式,轻松提高代谢检测通量
检测细胞耗氧率
耗氧率检测是细胞代谢,特别是线粒体功能分析的一个关键功能指标。通过此类活细胞代谢检测可深入了解细胞功能机制及疾病进程中的代谢紊乱机制。MitoXpresssXtra耗氧率检测试剂盒是研究代谢极其有用的工具,可在标准微孔板中轻松实现有氧代谢动力学分析。随着呼吸进行,样品中氧浓度下降, MitoXpresssXtra信号会随之上升。通过动力学分析可获得氧气消耗速率。
Figure 1:利用MitoXpresssXtra试剂盒对人iPSC分化的心肌细胞(Ncardia)进行耗氧率分析。用解偶联剂FCCP处理的细胞,由于呼吸速率加快,引起信号改变速率升高。相反,用线粒体呼吸抑制剂AntimycinnA处理,可引起相反效果:由于氧气消耗减弱,引起信号改变速率下降。这些检测兼容不同种类培养基,可使实验设计方便灵活。
Fig.1:(A)利用MitoXpresssXtra试剂盒分析iPSC分化心肌细胞(Ncardia)耗氧率。(B)通过分析MitoXpresssXtra信号变化速率可分析不同处理条件下的代谢情况。通常较低的变化速率提示着减弱的有氧代谢活性。
检测糖酵解活性
细胞外酸化检测是一种可为研究糖酵解活性提供大量信息的分析方案。此方案可在时间分辨荧光检测读板机上利用pH Xtra糖酵解检测试剂盒轻松实现。细胞外酸化主要是由丙酮酸向乳酸代谢转化引起。乳酸积累可导致溶液pH下降。pHhXtra探针可灵敏地检测到pH下降,表现为探针信号相应的上升。此类pH检测方法可为深入理解不同生理或病理条件下(包括癌症和细胞适应厌氧环境)糖酵解活性改变引起的主要影响提供重要分析方案。
Figure22:利用pHhXtra糖酵解检测试剂盒分析肺癌细胞系A549糖酵解活性。己糖激酶抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-DG)处理的细胞,胞外酸化被抑制,可看到探针信号下降。相反,线粒体ATP产生抑制剂OligomycinnA处理的细胞,利用糖酵解产生ATP的过程增加,用于维持细胞能量的稳态。
Fig.2:(A)利用pHhXtra糖酵解检测试剂盒分析A549细胞糖酵解活性。(B)随时间变化的胞外酸化变化可轻松转化成pH或[H+]离子浓度变化单位
细胞代谢和细胞呼吸的最佳分析平台
最佳选择
CLARIOstarPPlus读板机是检测所有细胞实验的最理想选择, 也是Meta-ReadyTM系统的主体。特别是它可为安捷伦代谢试剂MitoXpressXXtra耗氧检测,pHxXtra糖酵解检测和MitoXpress胞内氧检测提供最佳分析平台。该平台可通过荧光强度,标准时间分辨荧光和荧光寿命多种模式对这些指标进行检测。通过以下优化特色确保最佳检测结果:
>绝佳的TRF检测性能
>TRF双窗口检测,分析荧光寿命
>方便的TRF,FI 和OD600多参数检测
>顶读/底读均可自动聚焦
>特别优化的高性能滤光片组
最佳环境
大气控制模块(ACU)可在读板机内调控CO2和O2气体浓度,模拟活细胞实验所需要生理条件和厌氧条件。
结合精密温控和灵活震荡,ACU可为长时间活细胞实验提供最佳的“Walk-away”检测方案。
气体斜坡控制
Meta-ReadyTM独有的气体斜坡控制技术,可实现O2超快速斜坡调控。例如,在保持CO2浓度稳定的同时,ACU可快速去除O2,并同样可快速地使氧气浓度恢复至生理条件。这一特色可大大增强活细胞实验分析,例如缺血/再灌注活细胞模拟实验即可在此读板系统中实现。
两键点击获得结果
多年的实验经验和软件完善已最好地优化出最简易的操作过程。使用人员可在最短时间内轻松完成检测和数据分析。
BMGgLABTECH Meta-ReadyTM的软件预设检测程序和数据分析模版(专为MitoXpresssIntra,MitoXpresssXtra和 pH-Xtra检测分析优化)。专业优化的检测程序为使用人员提供了不同检测程序的最佳参数设置。使用人员无需其他调整,通过鼠标一键点击,即可开始收集数据。
检测糖酵解活性
独特的分析模版极大地方便了数据处理。鼠标一键点击专为代谢检测试剂优化的分析模版,各种运算过程便自动执行,所有分析结果即可自动呈现。
结合为不同试剂盒提供的优化设置,检测程序和数据分析模版,该方案可通过两次鼠标点击,即可完成代谢检测试剂的数据采集和分析,从而避免参数优化所消耗的时间,同时减少数据分析所需要的步骤。
H-Xtra检测结果可通过MARS分析模版直接转换成H+浓度单位