通过细胞外囊泡预测经导管主动脉瓣植入术后的病情发展

一项前瞻性、多中心队列研究

主动脉瓣狭窄(Aortic stenosis, AS)是最常见的需要介入治疗的瓣膜疾病，其患病率随着年龄的增长而增加。在50多岁的患者中，AS的发生率不到1%，而在80多岁的患者中，AS的发生率几乎为10%。主动脉瓣进行性变性是由脂蛋白沉积或慢性炎症等复杂因素引发的纤维重构的结果。临床上，严重的AS会阻碍血液从左心室流出，50%的患者在出现首次症状后2年内死亡。AS患者治疗的推荐干预措施包括手术主动脉瓣置换术(SAVR)或经导管主动脉瓣植入术(TAVI)。

波兰科研人员通过细胞外囊泡预测经导管主动脉瓣植入术后的预后——一项前瞻性、多中心队列研究。为了提高EV流式细胞术实验的可重复性，(i)应用了EV流式细胞术实验标准化报告框架(MIFlowCyt-EV) (ii)校准了所有检测器，(iii)通过流式细胞术散射比(FLOW-SR)确定了EV直径和折射率，(iv)应用定制软件完全自动化数据校准和处理。本研究在TAVI前1天和出院时采集血样使用Apogee A60流式细胞仪检测EVs浓度。TAVI后白细胞EVs浓度较术前降低。在123名出院患者中，19.5%的患者在10.3个月的中位时间内经历了主要不良心血管及脑血管事件(MACCE)。在多变量分析中，在TAVI前暴露于磷脂酰丝氨酸的EV浓度升高是MACCE独特的预测因子。

通过使用Apogeeflow A60分析经导管主动脉瓣植入术前后血浆细胞外囊泡(EVs)的浓度比较发现于治疗前相比，TAVI后白细胞中EVs浓度降低(图A)，TAVI后总EVs浓度有降低的趋势(图F)，其他亚型EVs浓度无显著差异。患者人数:123人（Fig.2）。

Fig.2

所有样品均使用Apogee A60平台进行分析。在TAVI前MACCE患者的白细胞EVs (CD45 +)浓度高于未经历MACCE的患者(A) 在经历MACCE的患者中，TAVI前暴露于PS的EV(PS +)(B)和TAVI后暴露于红细胞(CD235a +)(C)的EV浓度有升高的趋， ROC曲线预测MACCE (D)。患者人数:123人（Fig.3）。

Fig.3

图6具有代表性的流式细胞术图(A60-Micro, Apogee flow Systems)显示，暴露磷脂酰丝氨酸的EV在荧光检测器上呈阳性，对应于血小板耗尽血浆中的荧光素异硫代酸酯(FITC) EV(红门带红星)。FITC荧光以等效可溶性荧光染料(MESF)分子数的标准单位表示。红色gate左侧的粒子是FITC阴性区，对应于FITC检测器的背景噪声水平。红门以上的粒子的折射率为>1.42，对应阳性标记的乳糜微粒。

结论：TAVI前促凝剂浓度升高的患者，暴露于PS的EV在TAVI后出现不良后果的几率高出5倍以上。下一步是开展一项多中心试验，专门针对暴露于PS的EV，以预测TAVI后的MACCE。

英国Apogee超灵敏纳米流式分析仪，专为外泌体微囊泡（EVs）等小颗粒分析优化设计，在EVs样品颗粒大小分析，绝对定量，多标记物同时快速分析工作中广泛应用。截止目前，该设备已累计参与数百篇高质量同行审议文章相关实验分析工作。其出色的灵敏度，稳定性及可靠性已备受业内广泛认可，并将继续为EVs相关基础研究及转化应用提供坚实支持。

Apogee纳米流式除了可用于纳米级别的颗粒 （如：细胞外囊泡、外泌体、微生物、病毒颗粒、LNP） 等，还可以用于作常规动物细胞检测 （如免疫细胞、哺乳类动物细胞、等）。它是一台全面且功能强大的纳米流式分析仪！

欢迎关注进科驰安官方微信（微信公众号：Bio-Gene）
回复：apogee，查看更多相关视频
长按/扫描以下二维码可识别关注公众号

广州进科驰安科技有限公司
Bio-Gene Technology Ltd.
热线：176 2009 3784
www.bio-gene.com.cn
marketing@bio-gene.com.cn
香港 北京 上海 广州 济南