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    浙大医学院脑科学及脑医学院以优化的“Apogee纳米流式测试”以检测星形胶质细胞外泌体为帕金森病病变和诊断作研究

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    浙大医学院脑科学及脑医学院以优化的“Apogee纳米流式测试”以检测星形胶质细胞外泌体为帕金森病病变和诊断作研究

    α-突触核蛋白(α-syn)的积累是帕金森病 (Parkinson’s Disease, 简称PD) 发育和进展的重要步骤,不仅在神经元中观察到,而且在神经胶质细胞(包括星形胶质细胞)中也观察到。调节星形胶质细胞α-syn水平和聚集的机制尚不清楚。最近,科研人員已经证明α-syn的一部分扩散是通过细胞外囊泡(EV)发生,尽管目前尚不清楚在PD病变中星形胶质细胞是否参与這过程。然而,众所周知,源自中枢神经系统的EV存在于血液中,并被广泛探索为PD和其他神经退行性疾病的生物标志物。 

    在这文章中, 浙大医学院脑科学及脑医学院利用了Apogee纳米流式仪去检测PD病人, 多系统萎缩症 (Multiple System Atrophy, 简称MSA)病人和健康对照組(Healthy Control, 简称HC)的血清样本中的星形胶质细胞衍生的EVs(AEV)水平,以研究AEVs作为诊断PD的生物标志物。研究人员把這优化好的检测方法称为“Apogee assays”。



    首先,研究人员先证明“Apogee Assays”针对檢測血清中的AEV的特异性和稳定性。在这次检测中, 研究人员利用GLT-1 (glutamate transporter 1),总α-syn (SYN211)和聚集体α-syn (MJFR14)作为檢測AEV的标志物。GLT-1标志物会以Alexa Fluor 405荧光标志,从结果中可以看见GLT-1+的EVs可清楚于血清中检测出來,而IgG对照组只有很少量可检测出来(Fig.1a, d)。而SYN211和MJFR14则以Alex Fluor 488标志,检测结果也显示可在血清中可以明显地检测出来,而且比IgG对照组高出很多 (Fig. 1b, c, e, f)。同時,结果也证明GLT-1+,SYN211+和MJFR14+在EV耗盡的血清中的水平明顯地降低了很多 (Fig. 1a-f),这证明了“Apogee Assays”方法的特異性。最后,研究人员把GLT1,SYN211和MJFR14三个标志物的抗体进行不同浓度的稀释 (Fig. 1g-i)和孵育时间的改变进行測試,说明“Apogee Assays”的方法也有很好的稳定性 (Fig. 1j-l)。



    Fig. 1

    研究人员利用“Apogee Assays”并对106个PD病人样本,47 MSA病人样本和103个HC样本进行检测。从临床样本检测的结果中,GLT-1+、SYN211+、和MJFR14+在PD病人样本中的水平都比HC和MSA的样本为高。针对样本中带有总α-syn的AEV (GLT-1+/SYN211+)的水平,PD样本明显地比MSA样本和HC样本为高。而带有聚集体α-syn的AEV (GLT-1+/MJFR14+)的水平,在PD和MSA样本中也是明顯地比HC为高 (Fig. 2)。


    Fig.2

    文章在最后的总结中,指出利用“Apogee Assays”去检测血清中的带有α-syn的AEV水平,可以作为诊断PD的一个有用的生物标志检测方法。



    英国Apogee超灵敏纳米流式分析仪,专为外泌体微囊泡(EVs)等小颗粒分析优化设计,在EVs样品颗粒大小分析,绝对定量,多标记物同时快速分析工作中广泛应用。截止目前,该设备已累计参与数百篇高质量同行审议文章相关实验分析工作。其出色的灵敏度,稳定性及可靠性已备受业内广泛认可,并将继续为EVs相关基础研究及转化应用提供坚实支持。






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