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    利用纳米流式仪对Covid 19新型冠状病毒候选疫苗进行功能分析


    疫苗开发是一个复杂的过程,首先在探索阶段选择有希望的免疫原,然后在临床前期阶段进行工艺开发,然后再通过临床试验来进行工艺改进和扩大生产规模。整个过程大量的分析技术来了解候选疫苗,以便选择相关的免疫原,并在整个产品寿命期间始终如一地制造成品疫苗。

    对于病毒疫苗,成功的免疫原的产生取决于其维持的抗原性/感染性,以及在生产、制剂及临床表现的背景下表征的能力。


    流式病毒测定法是一种新兴的技术,为研究病毒和细胞外囊泡[1,2]开辟了新的途径。该技术允许利用粒子的光散射特性和分子标记,如特定的核酸或蛋白质抗原[3,4]。使用特异性抗体的能力使这些方法能够解决各种不同的问题,包括蛋白质成熟状态[5]或构象[6–8]。

    在本报告中,作者展示了基于水泡性口炎病毒(VSV)上表达的SARS-CoV-2刺突(S)蛋白的新型冠状病毒肺炎候选疫苗临床前开发过程中使用英国Apogee公司的A50纳米流式细胞仪对其进行相关的功能分析


    使用一组单克隆抗体,我们能够检测重组VSV病毒表面的S蛋白,监测其表达水平,检测基于S蛋白序列和病毒灭活后抗原的差异,从而监测S蛋白稳定性。

    总的来说,流式病毒测定法提供了重要的数据,有助于指导该候选疫苗的临床前开发。


    英国Apogee超灵敏纳米流式分析仪,专为外泌体微囊泡(EVs)等小颗粒分析优化设计,在EVs样品颗粒大小分析,绝对定量,多标记物同时快速分析工作中广泛应用。截止目前,该设备已累计参与数百篇高质量同行审议文章相关实验分析工作。其出色的灵敏度,稳定性及可靠性已备受业内广泛认可,并将继续为EVs相关基础研究及转化应用提供坚实支持。



    References

    [1] Lippé R, Glaunsinger BA. Flow virometry: a powerful tool to functionally characterize viruses. J Virol 2018;92(3).

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    [5] Zicari S, Arakelyan A, Fitzgerald W, Zaitseva E, Chernomordik LV, Margolis L, et al. Evaluation of the maturation of individual Dengue virions with flow virometry. Virology 2016;488:20–7.

    [6] Landowski M, Dabundo J, Liu Q, Nicola AV, Aguilar HC, Lyles DS. Nipah virion entry kinetics, composition, and conformational changes determined by enzymatic virus-like particles and new flow virometry tools. J Virol 2014;88 (24):14197–206.

    [7] Arakelyan A, Fitzgerald W, King DF, Rogers P, Cheeseman HM, Grivel J-C, et al. Flow virometry analysis of envelope glycoprotein conformations on individual HIV virions. Sci Rep 2017;7(1).

    [8] Staropoli I, Dufloo J, Ducher A, Commere P-H, Sartori-Rupp A, Novault S, et al. Flow Cytometry Analysis of HIV-1 Env Conformations at the Surface of Infected Cells and Virions: Role of Nef, CD4, and SERINC5. J Virol 2020;94(6).



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