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    生物发光实验孔间干扰解决方案123

    前,基于生物发光的应用非常广泛,比如报告基因、细胞活力和蛋白相互作用。我们在进行这些实验时,常常会遇到孔间干扰的问题。检测孔的发光测量值受到周围孔光的干扰,导致产生的信号读值比实际高,因此导致信噪比降低,假阳性,背景噪音变大。

    间干扰来自两个途径,一是周围孔的发光直接从孔的上方进入检测器,另一个是周围孔的光透过微孔板板材进入检测孔,导致检测孔读值比实际高。

    BMG LABTECH提供了多种解决方案将孔间干扰降到最低。BMG多功能酶标仪在硬件上设计了专用的适用于96/384/1536孔板的避光圈,从物理层面上阻挡来自周围孔上方的光,显著降低邻近孔的干扰。对于来自透过板材的光干扰,BMG在软件上提供了孔间干扰校正功能,一键点击自动完成干扰校正。此外,BMG在软件上还可以设置间行读板的方式,减少来自邻近孔透过板材的干扰。


    Figure 1 避光圈和软件孔间干扰校正


    Figure 2 间行读板方式

    除此之外,BMG LABTECH对其他影响孔间干扰的因素做了测试,并提供客观的建议供研究人员参考。

    一是实验所用微孔板的选择。经测试,使用白色微孔板灵敏度最高,其次是灰色板和黑板。但是白色板通过板材的孔间干扰也会比其他2种板大。对于一般的化学放光,白板是最优化的选择。


    Figure 3 三种微孔板灵敏度比较

    二是布板的选择。测试发现邻近孔样品浓度相差过大也会导致孔间干扰变大。因此在布板时需要避免邻近孔有大的浓度差异。


    Figure 4 优化布板格式

    BMG LABTECH提供了3种孔间干扰校正方案,加上选择合适的微孔板,注意样本的布板,我们就能把孔间干扰这个问题控制在最低水平,为实验分析提供更好的数据。



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