如何让ELISA自动化加速COVID-19检测
酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测SARS-CoV-2病毒的几种蛋白抗体的最常用检测方法之一,SARS-CoV-2病毒是导致COVID-19的病原体。在病毒表面发现的刺突蛋白 (S)是允许病毒进入宿主细胞的关键。核衣壳蛋白(N)与RNA一起位于病毒颗粒的中心。免疫球蛋白M和G(IgM和IgG)与N和S蛋白结合,这样这些复合物(例如N-IgM或S-IgG)就可以用ELISA进行检测。
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直接ELISA检测
在直接ELISA实验室检测中,带标记的捕获抗体被包埋在微孔板上。接下来,添加能识别并附着到捕获抗体的抗原。这个结合过程释放出改变颜色的生物素化酶,通过测量颜色的强度,可以确定目标抗体的数量和浓度。
间接ELISA检测
在间接ELISA检测中,有一些额外的步骤会增加检测过程的时间。不过这种方法比直接ELISA具有更高的灵敏度、更低的成本和更大的灵活性。主要的区别是使用两种抗体,一种结合感兴趣的抗原,第二种抗体在干扰被清洗后释放出标记物,可以减少分析背景,提高分析的灵敏度。
夹心ELISA检测
夹心ELISA法具有更高的特异性、灵敏度和灵活性,但由于使用了三种抗体,包括一组用于检测的两种抗体,因此比直接或间接的方法更难优化。添加第三种抗体增加了复杂性和成本,但比其他ELISA方法都更灵敏。
ELISA与Biacore在生物分析中的比较
ELISA与Biacore在生物分析中的比较
在2009年的一项ELISA比较实验的研究中,使用带有ELISA洗板机和自动微孔板读板仪的自动ELISA系统,与Biacore系统分析进行比较,结果显示,“ELISA对来源实验室的分析验证是忠实的,转移实验室的Biacore分析具有一致的偏差。”[1]
ELISA洗板机和ELISA读板仪,能帮助你最大限度地提高工作效率
考虑到自动化可以达到的精度,在单一ELISA方案中需要多次对各种生物活性和清洁底物进行清洗时,ELISA洗板机是一个不可或缺的工具。它不仅节省了时间和金钱,而且ELISA洗板机大大提高了每次洗板时所需的精密度,以确保准确和可重复的结果。
同样,微孔板读板仪也是高质量执行ELISA实验的重要组成部分。当实验室在微孔板上进行时,读板仪是唯一可行的检测手段。使用ELISA洗板机和ELISA读板仪进行自动化操作,可确保每次ELISA都准确无误。长期来看抵消了前期成本。
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1.Tatarewicz S., Moxness M., Weeraratne D., Zhou L., Hale M., Swanson S.J., & Chirmule N. (2009). A step-wise approach for transfer of immunogenicity assays during clinical drug development. AAPS J 11(3):526 at 533.
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