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    国际学会组建EV流式检测技术讲座 ─ 第二弹

    EV Flow Cytometry Working Group是一个合作性组织,里面的成员是细胞外囊泡、流式细胞仪和实验室医学等领域的科学家、创新者和专家,致力于开发更强大的流式细胞技术来研究包括外泌体和其他胞外囊泡在内的亚微米颗粒。该组织是由国际细胞外囊泡学会(ISEV)、国际流式细胞技术促进学会(ISAC)和国际血栓形成与止血学会(ISTH)三大学会的一批科学家于2015年4月25日,在ISEV年会上成立。


    Apogee超灵敏纳米流式细胞仪以其强大的光学模块和优异的散射光检测能力,在细胞外囊泡/外泌体检测方面获得许多EV Flow Cytometry Working Group成员的青睐,并利用Apogee纳米流式技术进行多种细胞外囊泡/外泌体检测实验方法的校准和优化,发表了多篇JEV期刊。 


    同时EV Flow Cytometry Working Group还会定期举办在线讲座,邀请细胞外囊泡/外泌体研究领域的专家学者进行技术交流,为了让大家更便捷地了解国外EVs圈的专家学者们的工作,伯齐科技将持续分享EV Flow Cytometry Working Group的在线讲座,感兴趣的老师可以关注伯齐微信公众号,及时获取最新资讯




    主题


    Size and refractive index determination of sub-micrometer particles using the flow cytometry scatter ratio (Flow-SR)



    讲者


    Edwin van der Pol博士,Amsterdam University Medical Centers, Netherlands



    摘要



    流式细胞仪以任意单位测量光散射信号,这阻碍了对数据的解释和比较,而这些光散射信号却又包含了关于粒子大小和组成的重要信息。现在这些信息可以通过校准来评估,这意味着将任意单位转换为标准化测量单位,例如以纳米为单位的直径。有一种散射检测器可以通过测量微球并用Mie理论来描述信号,同时考虑流式细胞仪的光学结构和微球的大小和折射率(RIs)来校准。RI是粒子的一种固有特性,它取决于粒子的组成,决定了粒子散射光的效率。当RI已知且散射检测器被校准时,Mie理论可用于推导胞外囊泡(EVs)的直径[1]。在本次讲座中,将解释通过获取侧散射和前向散射信号之间的比率,即流式细胞仪散射光比例分析法(Flow-SR),可以同时测定亚微米颗粒的直径和RI[2]。Flow-SR分析法可以实现对血浆中的EVs(RI<1.42)和脂蛋白颗粒(RI>1.45)进行无标记区分,并可用于评价抗体标记的特异性。我们可自动化Flow-SR分析法,并将其应用于EVs临床研究的数据分析[3]。



    [1] De Rond et al. Deriving extracellular vesicle size from scatter intensities measured by flow cytometry. Curr. Protoc. Cytom. e43, 1-14 (2018) 

    [2] van der Pol et al. Absolute sizing and label-free identification of extracellular vesicles by flow cytometry. Nanomedicine 14, 801-10 (2018)

    [3] Gasecka et al. Ticagrelor attenuates the increase of extracellular vesicles concentrations in plasma after acute myocardial infarction compared to clopidogrel. J. Thromb. Haemost. 18(3), 609-623 (2020)




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