超速离心法、尺寸排阻分离法、超滤法，还有沉淀法，面对众多的外泌体分离方法，究竟怎样确定哪种方法是最适合后续实验分析呢？

梅奥医学中心的科研工作者们利用粪便上清分离胞外囊泡（EV），用于结直肠癌早期诊断。他们评估了五种EV分离方法（超速离心[UC]、沉淀[EQ -O、EQ-TC]、尺寸排阻分离柱[SEC]和超滤[UF]）的总回收率、重现性、纯度、RNA组成和粪便上清液中的蛋白质表达。

为了估计EV的直径，研究人员使用Apogee Micro-Plus纳米流式细胞仪获取散射光数据，并将每个珠群的侧散射强度转换为纳米，获得EV的直径。为了测量EV分离/富集方法的回收效率，他们比较了分离/富集前后五个粪便样本的颗粒数，观察到超滤和尺寸排阻分离柱是回收颗粒的最有效方法。

通过Western blot分析发现超速离心法和尺寸排阻分离柱获得更高的颗粒与蛋白比。根据提取的RNA纯度的分析显示，尺寸排阻分离柱是最好的EV分离方法。        

研究人员在测试的五种技术中，认为尺寸排阻分离柱是基于回收率和纯度参数的最适合粪便上清液的EV分离方法。在未来，该方法可用于研究粪便衍生的EVs，作为生物标志物的潜在来源，以提高结直肠癌变之前的检测。

qEV尺寸排阻分离柱是由新西兰IZON公司研发和生产的一种基于尺寸排阻色谱法（Size Exclusion Chromatography, SEC）原理的外泌体分离-纯化技术。该技术具有简便、快速、容易标准化操作的特点，只需要15min就可以从多种类型样本中提取到完整的高纯度外泌体。相较于其他方法，qEV所提取的外泌体纯度更高、浓度更高、活性也更高，还可以重复使用。qEV分离的外泌体尤其适用于外泌体蛋白组和外泌体功能实验。

Apogee Micro-Plus纳米流式细胞仪（nFCM）可以分辨尺寸范围为80nm至1300nm的聚苯乙烯和二氧化硅微球，专门为检测纳米级小颗粒设计，非常适合细胞外囊泡、外泌体、大病毒和纳米颗粒的分析，能快速获取样本中细胞外囊泡的尺寸信息，准确浓度以及生物标志物的表达。

纯度高，活性好的样本是细胞外囊泡功能分析的基础，检测速度快，准确度高是分析细胞外囊泡的有力工具，欢迎前来伯齐科技咨询qEV尺寸排阻分离柱和Apogee纳米流式细胞仪。

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