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Apogee纳米流式超灵敏检测干细胞胞外微囊泡
来源: Admin    更新时间: 2018-05-08    浏览: 235 人次

由于哺乳动物心肌细胞具有极低的可再生能力,因此在心肌梗塞等疾病引起的心肌损伤治疗中,细胞治疗成为心肌细胞损伤修复的一大潜在途径,其中利用各类成体干细胞进行心肌损伤治疗的研究也备受关注。有研究表明,除了iPS细胞治疗,iPS胞外囊泡对心肌损伤修复也有重要作用。因此,研究探索iPS细胞和iPS胞外囊泡分别对心肌治疗的作用,对提高干细胞治疗心脏病疗法的安全性和高效性具有重要意义。


细胞外囊泡是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体,直径从40nm到1000nm不等。目前细胞外囊泡(EVs)的检测方法主要有扫描电子显微镜、原子力显微镜、动态光散射技术、纳米微粒追踪分析术、流式分析法,WB和ELISA等,研究调查统计发现流式分析法因其不仅可以检测囊泡的大小、数量,还可通过特异的标记物染色可以检对囊泡进行表征分类,已经成为囊泡快速、高通量、多参数检测的最优选择。然而,传统流式细胞仪散射光的检测极限通常是300-500nm,而大多数细胞外囊泡的直径都在300nm以下,所以传统流式分析系统散射光主要可检测细胞等大颗粒样品,直径小于300nm的细胞外微囊泡很难被其散射光检测到。 


最近,波兰雅盖隆大学实验室就针对性地利用传统流式细胞仪用作iPS细胞分析,采用专用型的Apogee高分辨率高灵敏度的纳米流式分析仪分析iPS胞外囊泡,发表研究文章发现iPS EVs具备可以刺激心脏发育、心肌细胞增殖、抑制氧化损伤等相关调控因子,明确了iPS胞外囊泡治疗心肌损伤的分子基础。文章所用的Apogee超灵敏纳米流式分析仪,曾被欧洲国家计量研究协会评定为在微泡(<0.1μm)检测中最灵敏的系统。该系统超高的灵敏度和分辨率,为微囊泡的研究带来了极大的便利,在微囊泡研究领域积累了越来越多的专业认可度。


iPSC-EV高分辨率流式分析


左图:不同大小的纳米标准微球流式分析

右图:利用Apogee超灵敏中间角散射光检测界定EVs,并利用荧光检测EVs特异蛋白


Apogee超灵敏纳米流式细胞仪简介:

超灵敏纳米流式细胞仪是英国Apogee Flow厂家研发,它独有的专行光学设计使其可检测最小70nm的小颗粒,并拥有10nm的分辨率。英国Apogee Flow的技术早前广泛为美国军方用于战场上的快速微生物检测。继之前北京中科院微生物所和北京计量研究所引入了Apogee流式细胞仪为微生物作快速流式检测和定量,上海第二军医大学转化医学中心也成功安装了超灵敏Apogee A50-Micro Plus型号来进行外泌体等微囊泡的科研工作。此外,每年在国际胞外囊泡大会上,更有不少科学家展示的研究成果中都是采用Apogee超灵敏纳米流式细胞仪来进行胞外囊泡研究。


参考文献


Adamiak M, Cheng G, Bobis-Wozowicz S, et al. Induced Pluripotent Stem Cell (iPSC)–Derived Extracellular Vesicles Are Safer and More Effective for Cardiac Repair Than iPSCsNovelty and Significance[J]. Circulation research, 2018, 122(2): 296-309.


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