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讲座回放:NGS二代测序质控解决方案
来源: Admin    更新时间: 2017-09-29    浏览: 161 人次

        对二代测序来说,装载的样本质量(核酸的质量和数量)非常重要。测序结果的成败往往取决于你是否知道你的样本有多少DNA(通常为ng级)。在NGS的工作流程中,从样品中抽提核酸到开始进行文库构建;文库构建后期——构建条码库用于扩增;在装载样品到测序系统上测序前的所构建文库的定量的几个关键点上,对扩增后的文库中的分子进行精确的定量检测,对于确保片段的质量和高效的获得数据是非常重要的。低估扩增文库中的分子数量,会导致混杂的信号以及难以解析的数据;相反地,高估分子的数量会降低结合模板的珠子或者DNA簇的产量,并且没有充分利用测序能力。因此准确对样本定量和评价质量决定了测序工作能否正常进行。

        核酸的定量通常有两种常用方法:紫外分光光度法和荧光法。这两种方法在检测原理、检测灵敏度和操作方法上的大不相同,在实际运用中需要根据具体的实验要求选择最佳的方法来进行核酸定量。

        此次讲座着重介绍几种基于多功能酶标仪系统的紫外分光光度法和荧光法核酸定量方案,为二代测序的样品前处理中的高通量核酸/文库定量提供更好的解决方案。






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