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CompresstomeTM应用II 基因功能研究:组织学连续切片
来源: Admin    更新时间: 2013-06-21    浏览: 682 人次
 
仪器应用手册Volume 7
CompresstomeTM应用II 基因功能研究:组织学连续切片
 

关键词:组织学(Histology), 基因功能(Gene Function), 免疫组织化学(Immunohistochemistry), 连续切片(Serial Sections),振动切片机(Vibratome)

基因功能的研究中,为了研究某种基因的功能或基因调控网络时需要同时在一个动物上对多个基因进行突变操作。这一类分析两个或多个基因的研究需要结合基因的原位杂交技术、基因表达蛋白的免疫组织化技术在发育的器官层面或组织切片的细胞层面来观察突变操作所造成的影响。随着更加先进的仪器的出现,研究技术也在不断的更新。通过结合亲脂性染料示踪原位杂交免疫组织化学组织学等多种技术从同一个动物中最大限度地获取器官各个组织层面的结构变化以及基因和蛋白表达的变化数据,使得基因敲除基因表达与组织学的数据更加紧密的关联起来。

通过亲脂性染料示踪后,将样本进行切片可获得组织学切片数据。为了获取厚度均一的连续切片我们推荐使用Compresstome VF-700振动切片机(Precisionary Instruments Inc., Greenville, North Carolina)。使用这种切片机使得切片的免疫抗原活性得以保存。冰冻切片机由于切片过程中染料泄露的问题而不适于此应用。
 
 
 

实验设计示意图:在同一个样本中进行如下四个技术操作:一、染料示踪;二、原位杂交显示mRNA表达;三、免疫组织化学显示蛋白的表达;四、组织学切片显示原位杂交和免疫织织化学染色结果。

 
 

注:新一代CompresstomeTM振动切片机通过琼脂凝胶将样本包埋在样本管中,并施以轻微的压缩使得组织被固定得更加牢靠,因此获得更好的切片效果(切片厚度更均一,切片表面更加光滑平整)。

相关链接:“Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology
视频链接:
http://www.jove.com/video/2451/combining-lipophilic-dye-situ-hybridization-immunohistochemistry?id=2451
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