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基于一种新型流式细胞仪来测量微小颗粒的测量校准标准
来源: Admin    更新时间: 2011-08-29    浏览: 924 人次
A new microparticle size calibration standard for use in measuring smaller microparticles using a new flow cytometer
基于一种新型流式细胞仪来测量微小颗粒的测量校准标准
W. L. CHANDLER, W. YEUNG, J. F. TAIT
 
 
背景:在流式细胞仪上利用聚苯乙烯微球来校准微粒直径的测量方法。聚苯乙烯微球比与其大小相近的细胞微粒具有更强的光散射能力。
方法:我们利用聚苯乙烯微球和二氧化硅微球与人造的脂质囊泡和血小板相对比,检测它们在LSRII, FC500 and Apogee A40上不同的前向角度光散射强度。然后,对比不同校准方法计数血浆中微粒的数目。
结果:在488nm波长情况下,有更高折射率的聚苯乙烯微球和二氧化硅微球相对脂质囊泡或血小板具有更强的光散射强度。对于直径小于0.5μm的聚苯乙烯微球,LSRII 和FC500无法计数,也不能利用大小将其分开。在Apogee A40流式细胞仪上,直径小至0.2 μm的聚苯乙烯微球也能够被有效分离,直径0.4μm的聚苯乙烯微球产生的光散射强度与直径1μm脂质体或细胞微粒的光散射强度相同。利用Apogee A40这种新的校准器,在血浆样本中总共发现了80 000–4 000 000/ μL微粒,11 000–350 000 /μL膜联蛋白微粒和6000–350 000/ μL血小板微粒。
结论:Apogee A40流式细胞仪能够分辨小至直径0.2 μm的聚苯乙烯微球、直径0.4 μm的微粒。在Apogee A40上,直径0.4μm的聚苯乙烯微球与1μm的细胞微粒有相同的正向散射强度,可以作为计量基准。利用此标准Apogee A40可以比Megamix Gate的方法检测出更多数量的微粒。
 
发表于Journal of Thrombosis and Haemostasis,6 JUN 2011,
作者:W. L. CHANDLER, W. YEUNG, J. F. TAIT,Department of Laboratory Medicine, University of Washington, Seattle, WA, USA.
 
 
 
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